Étape 15 : Advanced DIYBio analyse génétique : Extraction d’ADN
Les généticiens plus professionnel, moi y compris, ont le luxe d’avoir une qualité recherche et/ou bpl à faire des travaux de laboratoire en. Bien que je ne suis pas ne les projets de DIYBio au travaillent, il me donne la possibilité de me familiariser avec les techniques de biologie moléculaire, avant j’ai essayer de les recréer à la maison.
De loin, on les techniques plus difficiles à faire à la maison est l’un des plus élémentaires pour notre compréhension de la génétique, de l’extraction d’ADN et de Polymerase Chain Reaction (PCR).
Plusieurs Instructables membres ont déjà posté sur l’extraction de l’ADN de bricolage. Chaque méthode a ses avantages et ses inconvénients, et en fin de compte pas comme efficace ou exempt de contaminants de façon standard de laboratoire techniques utilisent des colonnes de silice ou de billes magnétiques. La méthode la plus simple pour le bricolage-biologistes utilise poinçons de papier, semblables au sang tache cartes, qui utilise la chaleur (à partir d’un thermocycleur en PCR) comme la principale méthode d’extraction de l’ADN mais il est aussi le moins efficace en raison de l’introduction des inhibiteurs de PCR (pour des prélèvements ADN, sang ou joue humaines peuvent être appliquées au livre). L’autre méthode populaire pour les biologistes DIY utilise des détergents et alcool, un processus plus difficile parce que les deux liquides sont miscibles, mais deux ' ibles ici et ici font un excellent travail d’expliquer. Vous pouvez également expérimenter avec les autres détergents/protéases, j’ai vu de savon à vaisselle, shampoing et attendrisseur de viande tous utilisés.
Personnellement, je suis partie à la méthode alcool et détergent/protéase pour une plus grande efficacité et le rendement, c' est si grand soin doit être utilisé pour réduire au minimum la contamination et report des alcool et détergents/protéases. Les effets de report peuvent être minimisés en utilisant les outils de transfert stérilisé (15 minutes dans un autocuiseur avec de l’eau distillée) et sécher complètement le culot d’ADN dans un environnement stérile (google technique stérile, une lampe à alcool peut être substituée à un bec Bunsen dans la plupart des applications).
Super bricolage-biologistes peuvent jusqu'à leur jeu en construisant un spectrophotomètre pour quantifier leur ADN. Je ne couvre cela ici, mais vous pouvez soit regarder en modifiant l’un des Laboratoires publics ou en suivant un les instructables plusieurs là-dessus. Quoi qu’il en soit, vous devrez construire afin qu’elle acceptera les cuvettes avec du liquide dedans.
