Conception, assemblage et vérification d’une Nanostructure de Origami ADN 2D (4 / 9 étapes)

Étape 4: Commande ADN et Kit de montage

Maintenant que nous avions conçu, visualisés et simulé la nanostructure, nous avons voulu le construire ! Avant que nous pouvions aller en laboratoire, il nous fallait commander les bons produits chimiques et l’ADN. De nos jours, ADN Origami peut être construit par un kit qui rend le processus très facile.

DNA Strand et Kit de montage d’échafaudage

Nous avons commandé le kit échafaudage et Assemblée de Nanosystèmes Tilibit à Munich, en Allemagne. Nous avons utilisé le standardt M13mp18 échafaudage ADN que l'on trouve dans pliante kit de base, de type p7249 et coûte ~ 140 € (150$).

Le contenu de la boite pliante base, type p7249 comprennent

• Bases de longueur 7249 500 μl 100 nM monocaténaire échafaudage ADN,
• Tampon de 500 μl tilibit 10 x pliage XM
• Solution mère de 200 mM de MgCl2 500 μl
• Tilibit μl 600 6 x gel colorant de chargement

Le kit est bon pour 25 réactions. Notez que le pliage tampon ici est essentiellement la même que tampon TAE.

DNA Strand discontinues

Nous avons commandé que l’agrafe se distingue IDT-ADN. Pour notre conception, 111 brins discontinues reçurent l’ordre 111 x 25 nmole séché granulés en plaques 2 x 96 puits pour $770,07 sur 24 juillet 2015 et est arrivé le 29 juillet 2015. Ces échantillons devront être remis en suspension dans l’eau MQ lors du montage. L’ADN est arrivé et a été stocké à-20 ° C. Ces peuplements discontinues 111 sont trouvent dans le fichier .csv créé par cadnano. Le tri est aussi simple que de copier + coller des séquences de ce fichier dans le portail IDT.