Étape 15 : Gestion de la machine
Pour tester la machine, nous avons mesuré une dilution en série de 2,3 diaminophenazine. Cela produit une réaction couramment utilisés dans un type de dosage biologique appelé ELISA. Dans l’essai, la substance à mesurer est capturée dans le puits de la microplaque, habituellement par un anticorps spécifique. Une enzyme appelée la peroxydase du raifort est couplée à l’anticorps et cette catalyse la transformation d’un composé incolore de o-phénylènediamine dihydrochloride (DPO) en un jaune : diaminophenazine 2,3. La réaction est montrée dans l’image ci-dessus.
L’intensité de la couleur est directement liée à la concentration de la substance étant analysée, et le dosage peut être adapté à différentes substances en utilisant des anticorps différents.
Nous avons mis en place une gamme de concentrations de 2,3 diaminophenazine pour tester la machine et vérifié sur un spectrophotomètre commercial. La machine que nous avons utilisé était un relativement bon marché - environ £ 10 000. Les graphiques de la machine commerciale et nos spectrophotomètre sont indiqués ci-dessus.
Je dois dire, cela a fonctionné mieux que nous ne l’imaginions qu'il serait. Les données sont vraiment très bonnes, bien que la machine commerciale peut lire les absorbances supérieurs avec précision - la linéarité est tombé en panne au sujet une = 1,0 pour notre machine. À une absorbance de 1, seulement 10 % de la lumière rend le détecteur et la sensibilité du détecteur devienne importante. Vous remarquerez que le gradient des deux lignes est différent, bien que cela pourrait être réglé en ajustant le calcul dans le code. Plus important encore, la machine a réussi à terminer un circuit complet des 96 échantillons dans un alignement parfait et puis revenir lui-même au point de départ.
