Étape 10 : Fluorimètre lectures d’échantillons et analyse des données
1. si la R ^ la valeur 2 est acceptable, de lire les 50 échantillons (y compris leurs doublons) sur le fluorimètre et de relever la valeur dans le cahier de laboratoire
Exemple : Les espèces de microorganismes: {78301
{80231.
double lecture sur le fond
Le double doit être une valeur similaire à la première lecture. Si ce n’est pas le cas, il est assez échantillon dans les deux tubes à relire. Si un des tubes a un fluorimètre lecture près de valeur de tube de 11 normes, cela signifie probablement qu'aucun ADN a été ajouté. Supprimez cette valeur de fluorimètre si c’est le cas et exécutez à nouveau cet échantillon.
2. avant d’entrer les valeurs de fluorimètre dans la feuille excel, examiner l’éventail du fluorimètre diluées de valeurs pour le 01:20 échantillons.
Assurez-vous qu’aucun de la lecture de l’échantillon sont plus élevés que la valeur standard la plus élevée. Dans ce cas, vous devrez réexécuter qui
échantillon à une dilution plus élevée.
3 . Entrer dans chacune des valeurs individuelles que vous lisez dans les premiers et deuxième cellules bleues comme indiqué sur la figure 3. Le nombre dans la cellule violette indique la concentration en ADN double brin en ng/ul, mais cela peut-être incorrecte.
4. pour vérifier que la concentration est correcte, double-cliquez sur la cellule violette et calculs devraient apparaître comme illustré en figure 4
-Ils doivent utiliser des cellules A-J, cellules K n’est pas inclus dans le graphique et le calcul pourpre.
-La flèche rouge pointant vers le 10 dans la figure 2 représente la quantité d’ADN qui a été aliquoté
* Si 5ul d’ADN a été aliquotés ce 10 doit être remplacé par 5 (aussi en supposant que cette 95ul de mémoire tampon TE X 1 a été ajouté)
N’oubliez pas que ces échantillons présentaient une 01:20 dilution donc examiner le 01:20 cellules de dilution sur la feuille excel. C’est la cellule violette multipliée par
20. c’est la valeur qui doit être enregistré.
5. une fois que ces calculs sont exacts, on enregistre la concentration de l’ADN, qui apparaît dans la cellule violette, dans le cahier de laboratoire
6 . Enregistrer les concentrations d’ADN sur chaque tube d’ADN avec un marqueur sharpie fine (figure 3)
