Étape 9: Fluorimètre Microsoft Excel feuille
2. feuille de sur the Excel, insérer la valeur de fluorimètre pour dilution standard 1 (tube 1) au titre de la colonne "0" / cellule (figure 1). Cela devrait être la plus faible valeur de fluorimètre.
3. entrez les valeurs de fluorimètre standard 11 restantes dans la colonne correcte comme indiqués sur la figure 1. Il doit être une diminution des valeurs de flurometer lorsque vous vous déplacez vers le bas de la ligne. Si un des isolats ne suit pas ce modèle, il serait préférable de supprimer ce point des autres 10 normes.
4. une fois tous les 11 normes saisies, une équation de régression linéaire et R ^ 2 apparaîtra (figure 2)
a. À une double vérification des points sur la ligne correspondant aux données dans les cellules, cliquez sur un des points sur le graphique. Une sélection
grille apparaît sur certaines des cellules. Cellules A8-J8 (ne pas inclure K8 ) doit être sélectionné.
b. toute r ^ 2 coefficient inférieur à 0,99 est inacceptable et les étalons doivent être recomposé (aller retour à la Création de normes de Dilution ADN )
c. graver le r ^ 2 valeur et équation de la droite dans le cahier de fluorimètre
Il est important de regarder si les points semble saturée (figure 3). Le dernier point commence à montrer une légère courbe indiquant la sursaturation. Cela peut se produire en raison d’une augmentation spectaculaire de l’ADN standard d’un standard à l’autre (à partir de 20ul puis à 50ul). Ceci habituellement sera pas un problème tant qu’il y a des augmentations plus progressives en ADN stnadards (20ul ; 40ul ; puis 50ul).
Même avec toutes ces précautions, plus de saturation peut encore se produire. Généralement pour corriger la saturation, supprimant le point causant la courbe va le réparer (figure 4). Dans ce cas, c’était le point culminant.
