Étape 3: Préparation (partie B)
2) après l’aliquotage, mettre les 2 tubes en congélateur ultra basse de-80 degrés Celsius.
3) tandis que les parties aliquotes sont gel, préparer 30 % SDS-PA gel master mix (tampon Tris, dodécyl sulfate de sodium et 30 % d’acrylamide/bisacrylamide mélange).
4) lorsque les parties aliquotes sont gelés, prendre un APS/TEMED aliquote et deux parties aliquotes APS sortis du congélateur et commencer à décongeler.
Notes :
* Puisque le gel SDS-PA peut allumer solidifiant lorsque les unités de l’acrylamide/bisacrylamide rencontrent l’APS radical (initiée par TEMED) APS tant TEMED sont habituellement le dernier ajouté.
Conseils :
1) température du corps (p. ex. en tenant les tubes par les doigts) dégèlera plus rapidement les tuyaux gelés.
2) plaques de verre avec différentes entretoises peuvent nécessiter différents volumes de la solution de gel pour pourvoir à la même hauteur.
3) pour 1 entretoise mm verre plaques (contenir jusqu'à 5,5 mL volume), 5 mL est suffisant pour le gel résolution tandis que 1 mL est suffisant pour le gel de concentration.