Étape 5: Procédure (j’ai essayé d’être aussi complet que possible. Être préparé - c’est très long)
PARTIE 1
1)-élaborer le plan de recherche et de visiter les centres commerciaux pour déterminer l’emplacement des terrains de jeu.
2)-consulter qualifié Directeur scientifique et de laboratoire dans un laboratoire certifié concernant le prélèvement de l’échantillon approprié, des procédures et sécurité.
3)-effectuer des recherches concernant les marques et types de sucettes qui sont disponibles à l’achat. Créer une feuille de calcul avec des informations sur les marques de sucette, identifier les caractéristiques, et si elles sont en latex ou silicone.
4)-le cas échéant, soumettre le plan de recherche pour approbation au directeur qualifié de scientifique et de laboratoire.
5)-régime 2 jours pour recueillir des sucettes à 2 différents centre commercial terrains de jeu.
6)-acheter environ 24 sucettes neuves (12 silicone et latex 12).
7)-le premier jour, allez dans un centre commercial avec microbiologiste qualifié.
8)-collecter 18 sucettes (9 silicone latex et 9). Continuer à collecter les suces jusqu'à obtient des nombres correspondants.
9)-porter des sacs stériles/stérile godets de prélèvement d’urine, des gants, un marqueur permanent noir et 24 nouvelles sucettes.
10)-localiser centre commercial parc pour enfants.
11)-Mettez des gants.
12)-localiser le parent/tuteur avec un enfant à l’aide d’une tétine.
13)-pour éliminer le risque si vous êtes un étudiant chercheur, ont un surveillant désigné approche parents et leur demander poliment si ils aimeraient participer à ce projet pour tenter de déterminer si les sucettes latex ou silicone hébergent les bactéries moins.
- un)-s’assurer que l’enfant est actuellement asymptomatique et pourrait être classé comme un « bien-bébé".
- b)-également s’assurer que l’enfant est de 2 ans ou plus jeunes. Sucettes seront recueillies auprès d’enfants de cette tranche d’âge afin de limiter la flore microbienne commune trouvée dans un "puits-baby" et donc susceptible de se trouver sur les sucettes dans l’étude.
14)-s’ils disent oui, demandez-leur de signer le consentement éclairé formulaire/questionnaire pour les donneurs de sucette et de répondre au sondage.
15)-écrire sur coupe/sac "Latex" si la sucette est latex ou écrire "Silicone" si la sucette est silicone. Également écrire le nombre de sujet sur la coupe/sac pour correspondre à la forme avec la sucette.
16)-donner participant une sucette Neuve pour remplacer l’ancien (silicone ou latex selon le type de don pour le projet).
17)-Ouvrez la tasse/sac pour sucette.
18)-ont mis participant utilisé sucette en sac/coupe.
19)-sac stérile/coupe à proximité.
20)-retirer les gants et jeter dans la poubelle de centre commercial.
21)-mettre sur une nouvelle paire de gants.
22)-Répétez les étapes 11 à 20, avec 17 autres parents et sucettes (ou parents supplémentaires si le nombre correct de sucettes de chaque type n’est pas collecté).
23)-mettre tous les latex scellés sacs/tasses dans deux grands sacs Ziploc.
24)-étiqueter ces sacs « Sucettes Latex. »
25)-obtenir deux autres sacs Ziploc.
26)-étiqueter ce sac « Sucettes Silicone. »
27)-mis toutes les sucettes silicone dans des sacs.
PARTIE 2 (effectués au laboratoire)
28)-voyage avec le chercheur qualifié au laboratoire.
29)-se préparer à faire des travaux de laboratoire en érigeant les cheveux et en mettant sur une blouse de laboratoire, se laver les mains, mise sur des lunettes de sécurité, sur des gants de latex stériles.
30)-exemple de 4 sucettes latex (1 unsucked control, 3 aspiré) et 4 sucettes silicone (1 unsucked control, 3 aspiré) avec un écouvillon stérile. Frotter la tête de l’écouvillon sur la tétine de la sucette. Mettre sur une nouvelle paire de gants entre chaque prélèvement d’échantillons pour prévenir la contamination croisée.
31)-remettre les écouvillons en emballage stérile.
32)-obtenir et label 8 Pétri préparés avec le marqueur permanent noir.
- a) - 1 plat - "Control - tétine Latex #1 pas de nettoyage"
- b) - plat 2 - "sucette Latex #2 pas de nettoyage"
- 3 - c)-plat "sucette Latex #3 pas de nettoyage"
- d) - plat 4 - "sucette Latex #4 pas de nettoyage"
- e) - plat 5 - "Control - tétine Silicone # 1 pas de nettoyage"
- f) - plat 6 - "tétine Silicone #2 pas de nettoyage"
- g) - plat 7 - "tétine Silicone #3 pas de nettoyage"
- h) - plat 8 - "tétine Silicone #4 pas de nettoyage"
33)-mettre sur la nouvelle paire de gants.
34)-retirer l’écouvillon d’exemple de paquet et le transfert de gélose sur plat 1 en faisant glisser l’écouvillon sur la gélose plusieurs fois tout en tournant l’écouvillon.
35)-utiliser de ruban adhésif pour sceller les boîtes de Pétri (à ne pas ouvrir). Apporter Pétri dûment rempli à l’incubateur.
36)-placer les plats sur des étagères dans incubateur à 37 degrés Celsius.
37)-Incuber pendant 48 heures.
38)-jour de collecte deux, si les spécimens suffisantes n’a été obtenues (9 de chaque type - latex, silicone), voyage à un autre centre commercial de microbiologiste qualifié.
39)-Répétez les étapes 7-27 au deuxième site collection (si nécessaire). Si les échantillons supplémentaires proviennent, répétez les étapes 28-38 au laboratoire avant de passer à l’étape 40.
40)-environ 48 heures après le début de l’incubation, voyager avec chercheur qualifié au laboratoire.
41)-se préparer à faire des travaux de laboratoire en érigeant les cheveux et en mettant sur une blouse de laboratoire, se laver les mains, mise sur des lunettes de sécurité, sur des gants de latex stériles.
42)-un par un, retirez soigneusement scellé Pétri d’incubateur sans enlever le couvercle.
43)-magasin au réfrigérateur à 6 degrés Celsius.
PARTIE 3 (effectués au laboratoire)
44)-éliminer les gants et mettre sur une nouvelle paire.
45)-obtenir une casserole propre 3 quarts.
46)-remplir avec 1 pinte d’eau distillée.
47)-porter l’eau à ébullition sur brûleur portatif en laboratoire.
48)-prendre une sucette latex qui était dans une tasse de sac/urine et mettre la sucette dans l’eau bouillante pendant 5 minutes. Soigneusement immerger la sucette dans l’eau.
49)-après 5 minutes, avec précaution Retirez la sucette de l’eau à l’aide de pinces métalliques et placer dans un sac stérile fraîche.
50) - Répétez les étapes 46 - 49 avec trois plus les sucettes latex et silicone (1 unsucked et 3 aspiré de chaque type).
51)-éteindre brûleur/cuisinière.
52)-Versez l’eau dans la casserole dans l’évier dans le laboratoire.
53)-ouvrir un paquet de l’écouvillon et sortez écouvillon stérile.
54)-chacun des 8 sucettes stérilisés (1 unsucked contrôle et 3 sucettes aspirés de chaque type) de l’échantillon en frottant la tête de l’écouvillon sur la sucette.
55)-retourner chaque écouvillon au package.
56)-retourner chaque sucette dans sac stérile et placez-le sur le côté.
57)-obtenir et identifiez les 8 boîtes de petri
- un) - plat 9 - "Control - stérilisé tétine latex #1".
- b) - plat 10 - "stérilisé latex suce #2. »
- c)-plat 11 - « #3 stérilisé tétine latex. »
- d) - plat 12 - "stérilisé latex suce #4. »
- e) - plat 13 - "Control - tétine silicone stérilisé #1".
- f) - plat 14 - "stérilisé silicone sucette #2. »
- g) - plat 15 - "stérilisé silicone sucette #3. »
- h) - plat 16 - "stérilisé silicone sucette #4. »
58)-mettre sur la nouvelle paire de gants.
59)-obtenir plat 9 - "Control - stérilisé tétine latex # 1".
60)-sortir une sucette unsucked, latex, qui a été stérilisée.
61)-exemple de transfert de gélose sur plat 9 en traînant l’écouvillon sur la gélose plusieurs fois tout en tournant l’écouvillon.
62)-disposer d’écouvillon correctement dans le sac d’élimination des déchets médicaux.
63)-Répétez les étapes à l’aide de 58-62 plats 10-16.
64)-éliminer les gants et mettre sur une nouvelle paire.
65)-utiliser de ruban adhésif pour sceller les boîtes de Pétri (à ne pas ouvrir). Une fois que toutes les boîtes de Pétri sont prêtes, mettre les 8 plats en incubateur pendant 48 heures à une température de 37 degrés Celsius.
66)-correctement disposer de gants et tasses / sacs que les sucettes étaient (dans des sacs de déchets médicaux de laboratoire).
67)-après 48 heures, voyager avec chercheur qualifié au laboratoire.
68)-se préparer à faire des travaux de laboratoire en érigeant les cheveux et en mettant sur une blouse de laboratoire, se laver les mains, mise sur des lunettes de sécurité, sur des gants de latex stériles.
69)-Retirer soigneusement tous les 8 scellé Pétri d’incubateur sans enlever les couvercles.
70)-magasin au réfrigérateur à 6 degrés Celsius (maintenant plats 1-16 sont dans le réfrigérateur).
PARTIE 4 (effectués au laboratoire)
71)-éliminer les gants et mettre sur une nouvelle paire.
72)-obtenir et label 8 Pétri préparés avec le marqueur permanent noir.
- un) - plat 17 - "Control - lavés à la main Latex suce #1"
- b) - plat 18 - « Latex sucette #2 main lavée »
- c)-plat 19 - "main sucette #3 Latex lavé"
- d) - plat 20 - « Latex sucette #4 main lavée »
- e) - plat 21 - "Control - lavés à la main Silicone sucette # 1"
- f) - plat 22 - « Silicone sucette #2 main lavée »
- g) - plat 23 - « Silicone sucette #3 main lavée »
- h) - plat 24 - "Silicone sucette #4 main lavée"
73)-déplacer des plats sur le côté.
74)-obtenir un contrôle, sucette latex unsucked.
75)-laver la tétine sous l’eau chaude, avec du savon liquide pour la vaisselle, pendant 5 secondes.
76)-obtenir une serviette en papier et sécher la tétine.
77)-open écouvillon stérile dans le paquet.
78)-goûter la sucette latex en frottant la tête de l’écouvillon sur la tétine de la sucette.
79)-remettre la sucette latex en coupe/sac et placez-le sur le côté.
80)-exemple de transfert de gélose sur plat 17 en traînant l’écouvillon sur la gélose plusieurs fois tout en tournant l’écouvillon.
81)-mettez le couvercle sur le plat et le sceller avec du ruban adhésif (pour ne pas être ouvert).
82)-mouvement plat 17 sur le côté.
83)-disposer d’écouvillon correctement dans le sac d’élimination des déchets médicaux.
84)-éliminer les gants et mettre sur une nouvelle paire.
85)-Répétez les étapes 74-84 avec plats 18 à 24, avec le type de l’échantillon approprié ou le contrôle.
86)-jeter toutes les sucettes échantillonnés dans le sac d’élimination des déchets médicaux.
87)-une fois que tous les plats sont inoculées, soigneusement, une par une, placer tous les 8 boîtes scellées dans l’étuve pendant 48 heures à une température de 37 degrés Celsius.
88)-après 48 heures, voyager avec chercheur qualifié au laboratoire.
89)-se préparer à faire des travaux de laboratoire en érigeant les cheveux et en mettant sur une blouse de laboratoire, se laver les mains, mise sur des lunettes de sécurité, sur des gants de latex stériles.
90)-Retirer soigneusement tous les 8 scellé Pétri d’incubateur sans enlever les couvercles.
91)-magasin au réfrigérateur à 6 degrés Celsius (maintenant plats 1-24 sont dans le réfrigérateur).
PARTIE 5 (effectués au laboratoire)
92)-voyage avec le chercheur qualifié au laboratoire.
93)-se préparer à faire des travaux de laboratoire en érigeant les cheveux et en mettant sur une blouse de laboratoire, se laver les mains, mise sur des lunettes de sécurité, sur des gants de latex stériles.
94)-remove plats 1-24 de réfrigérateur.
95)-transfert plat 1 à la table de laboratoire.
96)-regarder dans la boîte de Pétri, le garder fermé et scellé. Compter toutes les colonies de bactéries à l’aide de lignes de la grille sur la boîte de Pétri. Compte rendu. Calculer le pourcentage de grilles occupée par la croissance microbienne sur le plat.
97)-enregistrer des observations supplémentaires au sujet de l’apparence de la capsule scellée.
98)-essayez de déterminer les types de bactéries dans le plat en utilisant le manuel de Bergey pour identifier les bactéries.
99)-enregistrer des observations supplémentaires.
100)-Répétez les étapes 95-99 avec plats 2-24.
101)-quand fait enregistrer les observations de tous les échantillons, sceller le sac d’élimination des déchets et laisser en laboratoire pour la mise au rebut correcte.
102)-les moyens de chacun des 6 ensembles de données (3 différentes méthodes de traitement pour chacun des 2 types de sucettes), seront analysés en préparant un affichage de l’histogramme du nombre de colonies présentes sur chacun des ensembles de données 6.
