Étape 4: Culture de Vibrio fischeri
Si vous êtes intéressé par cet essai de toxicité facile vous devez pour savoir comment la culture Vibrio fischeri.
Dans un premier temps que vous devez acheter un échantillon des bactéries. Vous pouvez le faire sur :
http://www.Carolina.com/bacteria/Vibrio-fischeri-l...
J’ai trouvé une explication parfaite et détaillée à la culture de cette bactérie par Courtney Chinn :
https://www.tes.com/Lessons/_2Ze-DjyhYGzpg/bioluminescence-Light-Bulb?Redirect-BS=1
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ÉTAPE 1 :
Avant d’ajouter les bactéries, il faut d’abord faire leur nourriture. Cela servira la la source d’énergie pour les bactéries. La base de gélose trypticase regorge de vitamines, minéraux, acides aminés, carbone et le sel.
-Mélanger le milieu gélosé (125 ml) et 40 grammes de sel d’aquarium dans une grande casserole.
-Couvrir avec le couvercle pour créer l’atmosphère autocuiseur (cela se résument le sel de la corse)
-Ajouter 1/4 tasse d’eau distillée. (comme tout autre organisme, Vibrio Fischeri ont besoin d’eau trop)
-Couvrir à nouveau et laisser reposer pendant 45 minutes, remuer le mélange parfois pour enlever les grumeaux.
ÉTAPE 2 :
-Récupérer les boîtes de Pétri stériles et ouvrir légèrement
-Versez dans le mélange agar et remplacer le couvercle en place
-Puisque c’est un gel qu'assez rapidement, il doit affecter. maintenant vous êtes prêt pour les bactéries
ÉTAPE 3 :
-Éteignez toutes les lumières et examiner les Vibrio fischeri dans le plat, qu'ils sont venus po (donner vos yeux et les bactéries du temps pour s’adapter à l’obscurité)
-Prenez un bout de Q stérile et échanger les bactéries et le mettre dans la boîte de Pétri avec le mélange que vous avez fait (quand vous le faites, colonies de marque isolé sur tous les coins du plat. Ce type de bactéries peut être un peu égoïste quand il s’agit de partage de l’espace)
-Couvercle à l’arrière tous les couvercles et déplacer les bactéries à un endroit frais et sombre. Les bactéries ont besoin d’une zone sombre pour prospérer. Couvrir avec journal d’assurer qu'aucune lumière n’obtient po (les bactéries devraient être laissées à la culture 8-24 hrs)
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Si vous êtes un bon enquêteur, vous pouvez choisir l’option pauvre mais il vaut mieux :
Vibrio fischeri est une bactérie symbiotique qui vit dans la peau de certains mollusques marins comme sépia ou de calmars. Vous pouvez essayer de l’isoler en essayant de la culture des échantillons de peau de calmar. Lorsque vous obtenez une colonie isolée you´ll être le meilleur isolateur de Vibrio fischeri dans le monde!!!
* Toutes les photos de cette section ne sont pas de ma propriété, j’ai seulement le montre comme une explication des exemples.