Préparer votre propre couche mince plaques de chromatographie (et puis en les utilisant)

la chromatographie est une technique largement utilisée en chimie analytique et préparative. Il a d’abord fait pratique par Tswett pour la séparation des chlorophylles mais a depuis été transformé en un immense champ d’étude avec un large éventail d’instruments et de techniques. Fondamentalement, toutefois, le principe qui sous-tend la GC-MS, vous pouvez voir sur CSI et cette simple colonne de carbonate de calcium Tsvet utilisé pour séparer des pigments végétaux reste le même.

Un mélange inconnu a poussé passé ce qu’on appelle la phase stationnaire en flux continu, il peut être un solide dans le cas de TLC, ou un liquide, comme c’est le cas dans de nombreuses formes de GC. La nature exacte de la phase stationnaire n’est pas si importante, il est important que les composants individuels du mélange inconnu interagissent avec la phase stationnaire en quelque sorte. Ceux qui interagissent plus fortement et préfèrent rester associé à la phase stationnaire par rapport à la solution (ou en phase gazeuse) seront déplace lentement et rentra dans le flux. Espèces interagissant faiblement se déplacent plus rapidement dans le flux. De cette manière les différents composants du mélange peuvent distinguer par la quantité de temps qu’il faut pour eux pour éluer : se déplacer dans une colonne de phase stationnaire.

Une mesure de combien fortement ou faiblement un composé est retenu est le Facteur de rétention (RF) ou le Temps de rétention. Dans TLC la RF d’un composé peut être utilisé pour l’identifier de valeurs tabulées. Le facteur de rétention est le rapport entre la distance parcourue par le composé vers le haut de la plaque par rapport à la distance parcourue par le front du solvant. La Fédération de Russie pour une substance donnée est (relativement) unique, puisqu’il dépend de la structure et la composition chimique de ce composé.

Dans ce instructable je vais décrire comment on peut préparer leurs propres plaques de CCM (chromatographie couche mince) de gel de silice. Dans cette forme de chromatographie en phase, la phase stationnaire est une mince couche de silice, un type de finement divisé, dioxyde de silice déposé sur une lame de verre. L’analyte est « taché » sur la plaque à l’aide d’une pipette ou une micropipette et une plaque entière est placée dans un bécher avec une petite quantité de solvant dans le fond tel que le niveau de solvant est juste au-dessus du fond de la plaque. Le solvant se déplace vers le haut de la plaque par capillarité, tirant le pigment avec elle. Les différentes espèces chimiques dans le pigment interagissent avec la silice de différentes façons et cela influe sur le degré auquel ils sont tirés vers le haut de la plaque, qui est la façon dont la séparation est effectuée.

Une version plus basique de ce remplace une bande de papier robuste à la place de la plaque de TLC, dans lequel cas la cellulose du papier remplit le rôle de la phase stationnaire au lieu de silice. La chromatographie sur papier a ses limites, cependant, se faisant généralement visible sous la forme bavures ou mauvaise séparation. C’est pourquoi la chromatographie sur couche mince est habituellement employé. Il fonctionne de la même façon que la chromatographie sur papier en autant que le développement, mais séparation pic est généralement préférable (entre autres).