Étape 4: Tuer les cellules
Figure 3: Libération de chloroplastes de leurs bactéries mortes
Ajouter 1mL de méthanol dans les tubes de microcentrifuge. Assurez-vous de plafonner le contenant du méthanol, quand ce n’est pas en cours d’utilisation. Le méthanol est un produit chimique volatil, ce qui signifie qu’il s’évaporera à la température ambiante. Vortex tous les échantillons pour s’assurer que toutes les cellules sont cassés et les chloroplastes sont libérés. Cette étape est particulièrement importante si il n’y a rien dans les médias avec les bactéries (par exemple les salissures ou métaux catalytiques). Suivez les instructions sur votre vortex de l’utiliser, même si la plupart est activée, lorsque mis en marche, en appuyant sur votre tube vers le bas sur la plaque. Voir la figure 3.
Nous recommandons fortement d’utiliser un vortex pour briser les cellules ouvertes. Toutefois, si un vortex n’est pas disponible, cette étape peut être également faite en agitant vigoureusement les tubes de microcentrifuge. Tandis que Vortex peut prennent que quelques secondes, il est recommandé de secouer pendant au moins 5 minutes. Toutes les particules visibles devraient s’enlever les côtés et le fond du tube. Si vous utilisez également des cyanobactéries, l’échantillon devrait perdre sa couleur verte et devenir bleu.
