Étape 2: Anatomie d’un microscope
Anatomie d’un Microscope
Cette étape est sur les différentes parties d’un microscope. (Si déjà, vous savez ou voulez vous salir les mains, enregistrez ce bit pour plus tard.)
Le type de microscope, que nous allons utiliser est un microscope composé optique conçu pour visualiser les échantillons en « diascopie ». Cela signifie que la lumière passe à travers l’échantillon au lieu d’être réfléchie par elle.
Un microscope composé utilise une combinaison d’un objectif et en oculaire. La lentille de l’objectif se concentre une image réelle de l’objet à l’intérieur du tube du microscope qui est ensuite amplifié par l’oculaire pour donner une image agrandie de l’objet. Cette image apparaît inversée. En utilisant une combinaison des deux optiques, un grossissement supérieur peut être atteint et objectifs peuvent être échangés pour que plusieurs facteurs de grossissement différents sont disponibles dans un seul appareil.
Facteurs de grossissement de la gamme de lentilles de l’objectif de 3 x à 100 x, celui des oculaires d’environ 5 x à x 15 environ. Le grossissement total varie donc entre environ 15 x 1500 x. Toutefois, vous utiliserez rarement les facteurs de grossissement qui sont très élevés, parce qu’à fort grossissement, l’image n’est pas très forte et a peu de contraste.
Objectifs ont également un paramètre appelé ouverture numérique (abrégé en NA) gravée sur eux. Semblable à l’ouverture dans les lentilles de la photographie, c’est le paramètre déterminant le pouvoir de résolution de cet objectif et la quantité de lumière est laisse passer à travers elle. Il va généralement de 0,1 pour un objectif 3 x à 1.4 1,25 ou même pour un objectif 100 x.
Objectifs de faible grossissement comme 8 x, 10 x ou 15 x sont utilisés pour enquêtes rugueux, par exemple en botanique et entomologie. Norme biologiques ensembles comprennent généralement 10 x, 40 x et 100 objectifs de x, un objectif supplémentaire 20 x se révélera souvent précieux.
Apprêt de Sterrenburg sur la microscopie recommande une bonne routine donnant des étapes de grossissement gérable d’environ 2 x la valeur serait comme suit : 10 x / NA 0,25 ou 0,3 ; 20 x / NA 0,45 ; 40 x / NA 0,65 ; 100 x / 1,25 NA ou 1.3
La plupart des microscopes se compose des mêmes composantes structurelles.
- Oculaire (lentille oculaire)
- Cadre
- Revolver, revolver ou embout rotatif (pour contenir plusieurs lentilles de l’objectif)
- Lentilles de l’objectif
- Boutons de mise au point (à déplacer la scène)
- A: réglage grossier
Condenseurs
Notre microscope a deux différentes interchangeables condenseurs; un traditionnel et un condenseur à fond noir. La fonction du condensateur est de remplir l’objectif uniformément avec un cône de lumière. Ce cône de lumière est étroit pour un objectif de faible ouverture, mais doit être très large pour l’une des grande ouverture. Le condenseur vous permettent d’ajuster la largeur du code en ajustant la distance entre le condenseur et votre échantillon. Régions de l’objectif qui ne reçoivent pas de lumière ne peut pas participer pleinement à la formation d’images !
Sans un condensateur, la lumière venant de notre source d’illumination ne distribuerait pas uniformément et peut monter l’image du filament ampoule sur notre échantillon. Il présentera également des objets tels que l’éblouissement et l’occultation de l’image. Bien qu’il existe d’autres méthodes de diffusion de la lumière tels que les diffuseurs en verre opale diffusent également l’image du filament, toutes ces réduire l’intensité de l’éclairage. Notre bon « Éclairage de Koehler » réalise toutefois rouleuse en veillant à ce que l’image de la source lumineuse est parfaitement défocalisé sur le plan de l’échantillon.
Eclairage de fond noir
Un gros inconvénient du microscope optique est le faible contraste: vous avez besoin d’utiliser des tranches très fines qui permettent le plus souvent la plupart de la lumière passe à travers. Ainsi, ce que vous obtenez est une image lumineuse avec très peu de contraste et il peut parfois être assez difficile de distinguer certaines caractéristiques distinctes que vous cherchez. C’est pourquoi les gens ont mis au point différentes méthodes pour renforcer le contraste des images microscopiques. Tandis que la coloration (ie. Ajout de colorant et puis laver l’échantillon) est la plus simple et la plus courante, quelques méthodes accomplir des résultats remarquables sans changer votre spécimen, uniquement en manipulant de lumière.
Partie bloc Darkfield condenseurs de la lumière qui provenance directement de la source lumineuse avant il frappe l’échantillon, mais laisse une bague extérieure d’illumination à travers à travers qui éclaire l’échantillon du côté. (Semblable à comment, dans une salle avec les rideaux tirés presque pendant une journée ensoleillée à l’exception d’une fente étroite, les particules de poussière minuscule deviennent visibles dans le faisceau de lumière du soleil.) Seulement la lumière dispersée continue à produire de l’image, tandis que la lumière directement transmise est bloquée.
Cette technique est particulièrement adaptée aux échantillons biologiques qui sont très transparents, tels que les organismes unicellulaires ou autres organites hydriques. Bien que sous une lumière normale, ils pourraient être des objets justes à peine visibles sur un fond blanc lumineux, ils apparaissent comme des objets lumineux sur fond noir lorsque darkfield microscopy est utilisé.
Ce microscope a un condenseur à fond noir, nous ne l’utiliser cette fois. Bientôt à venir cependant. Dans l’intervalle, se familiariser avec le matériel à portée de main.
Maintenant, nous allons salir nos mains...
Sources :
Livre photographié est: « Das Mikroskop » par Dr. Ludwig Otto, 1952
« Microscopy Primer » par Frithjof A. S. Sterrenburg http://www.microscopy-uk.org.uk/index.html?http:/ /...